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Q. qc, hplc기기를 다룰 때 injection volume

1.injection volume이 결과값에 영향을 미친다고 배웠는데 어떤식으로 영향을 주고 그 양을 정하는 식같은게 있는건가요??
2.flow rate도 영향을 준다고 배웠는데 이것도 식같운게 있는건가요? 아니면 제가 크로마토그램을 보고 조절하는건가요?
3.그리고 hplc를 다룰때 작업자가 주의해야할 부분이 따로 더 있을까요?

답변 3
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1. Injection volume이 결과값에 영향을 미치는 이유는 크로마토그래피에서 사용되는 칼럼의 용량(capacity)과 관련이 있습니다. 칼럼의 용량은 정해진 양의 시료를 처리하는 데에 필요한 최대 시료 양을 의미합니다. 따라서 injection volume이 칼럼의 용량보다 크면 시료가 불완전하게 처리되어 정확한 분석 결과를 얻을 수 없게 됩니다. 따라서 injection volume은 칼럼의 용량보다 작게 설정하는 것이 중요합니다. 일반적으로 injection volume은 칼럼의 용량의 5% 미만으로 설정하는 것이 좋습니다.

2. Flow rate는 분석 시간과 분리도에 영향을 미치는 중요한 요소입니다. 이론적으로는 flow rate이 높을수록 분석 시간이 단축되지만, 실제로는 flow rate이 너무 높으면 시료의 분리가 충분하지 않아 정확한 분석 결과를 얻을 수 없게 됩니다. 따라서 flow rate은 시료의 분리도를 고려하여 최적의 값을 찾는 것이 중요합니다. 보통은 제조사에서 권장하는 flow rate 범위 안에서 조절하는 것이 좋습니다.

3. HPLC를 다룰 때에는 다음과 같은 사항에 주의해야 합니다.
- 시료의 성질과 적절한 추출 방법을 선택하는 것이 중요합니다.
- 시료의 용해도를 고려하여 용매를 선택하고, 시료의 농도를 조절하는 것이 중요합니다.
- 시료의 주입 전에는 반드시 시료를 여러 번 주사하여 시스템을 정리하고, 미리 주입한 시료와 같은 용매로 칼럼을 깨끗이 씻어주는 것이 좋습니다.
- 분석 중에는 칼럼의 온도와 압력을 적절하게 조절하는 것이 중요합니다.
- 분석이 끝난 후에는 시스템을 정리하여 오염을 방지하는 것이 중요합니다.

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곰직원
코부장 ∙ 채택률 91%

안녕하세요. 멘티님.

분석기기와 관련된 교육, 메뉴얼, 전공 책들을 보시면 관련된 이론, 기기, 사용방법 등 알 수 있으니 품질관리 직무로 취업하시길 희망하신다면 필수로 따로 공부를 하셔야 됩니다.

1. injection volume은 주입되는 시료의 양이 결정되고, 이에 따라 peak가 증가하거나 감소할 수 있습니다. 너무 많은 volume이 들어가게 되면 peak가 잘릴 수 있거나 impurity 가 크게 나올 수 있어요. volume이 너무 작게 들어가게 되면 impurity 등이 검출 안 될 수도 있어요. 물질에 따라 파장에 따라 분석 방법에 따라 검출 정도가 달라지고, 관련된 식들도 많아요.

2. flow rate 도 당연히 영향을 주며 분석 시간이 길어질수도, 분석 시간이 짧아질수도 있고, flow rate에 따라 분리 정도가 감소할 수도 있고, 분리가 잘 될수도 있어요. 이는 컬럼의 종류, 이동상의 비율, 고정상, 분석 방법, 파장의 세기, 온도.... 여러가지 요인이 있습니다.

3. 작업자가 주의할 사항이 너무 많죠. 시료의 전처리, 시료의 보관 방법, 장비 유지, 장비 조절, 안전절차, 데이터해석... 등등

좋은 말은 도움이 안 될테니. 솔직하게 말씀을 드리면 질문의 수준을 보았을 때 해당 직무로 일하기가 어려운 수준의 기초적인 질문입니다. 해당 직무로 일하고 싶다면 최소한 직무와 관련된 기초적인 부분은 공부를 하면 충분히 알수 있는 부분이고, 해당 직무의 경쟁자들은 심화된 전공 지식을 쌓은 사람들이기 때문에 해당 직무로 일하시고 싶다면 관련 전공 공부는 필수로 하셔야 됩니다.


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1. 주입량 경우, 결과적으로 분석하고자하는 물질에 양에 차이가 나기 때문에 피크 면적에 영향을 주게 되고, 피크면적이 커지게되면서 시스템적합성factor(이론단수, S/N,피크모양등)에 영향을 줍니다. 제약에서는 연구실에서 해당 분석법을 개발할때 정하고 공정서 내 주입량이 설정 되어있습니다.
2.유량 경우에도 RT에 영향을 주게됩니다.(유지시간) 두물질이상 분석하고자할 때 유량이 크게되면 분리도가 낮게 나오는 경향이 있습니다. 위와같이 제약에서는 동일하게 관리되며 USP일반시험법<621>참고하시면됩니다.
3.기기 유지보수 측면에서는 이동상에 따라 적절한 방법으로 세척하는게 매우중요합니다. 역상, 순상에 따라 이동상 조성이 다르기 때문에 이부분을 숙지하셔야합니다.


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